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Pharos STEM 臺(tái)式場發(fā)射電鏡:外泌體形貌與粒徑分析解決方案

 更新時(shí)間:2026-01-06 點(diǎn)擊量:960

Pharos STEM 臺(tái)式場發(fā)射生物電鏡

外泌體是一類由細(xì)胞主動(dòng)分泌的納米級(jí)細(xì)胞外囊泡,已成為生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重要的研究方向。它們不僅是細(xì)胞間通訊的關(guān)鍵介質(zhì),更在疾病診斷、治療機(jī)制和藥物遞送等方面展現(xiàn)出巨大潛力。

 

PART01.外泌體是什么?

所有細(xì)胞,包括原核生物和真核生物,在其正常生理過程中以及在獲得性異常情況下都會(huì)釋放細(xì)胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)。EVs 可以分為 3 個(gè)亞群:外泌體(Exosomes,EXOs)、微囊泡(Microvesicles,MVs)和凋亡小體(Apoptotic bodies,ABs)。外泌體是其中最小的 EVs,直徑約為 30-150 nm (平均約 100 nm),起源于細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)吞系統(tǒng)。其廣泛存在多種生理體液中,例如精液、血液、尿液、唾液、母乳、羊水、腹水、腦脊液和膽汁等。

 

圖 1:細(xì)胞外囊泡的三種亞群

外泌體并非細(xì)胞廢物,而是細(xì)胞主動(dòng)釋放的、用于精密通訊的“納米快遞"。其核心作用體現(xiàn)在:

 

01.細(xì)胞間通訊的關(guān)鍵介質(zhì)

 

外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、RNA(如miRNA、mRNA)和 DNA 片段,能在細(xì)胞之間遠(yuǎn)距離傳遞信息,從而協(xié)調(diào)生理和病理過程,如免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)和腫瘤進(jìn)展。

 

02.與疾病密切相關(guān)

 

外泌體與免疫反應(yīng)、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和癌癥進(jìn)展密切相關(guān),其遞送至受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)、代謝物和核酸能夠有效改變其生物學(xué)反應(yīng)。這種外泌體介導(dǎo)的反應(yīng)既可以促進(jìn)疾病進(jìn)展,也可以抑制疾病發(fā)展。

 

PART02.外泌體的形成

 

外泌體的生物合成過程復(fù)雜,細(xì)胞膜內(nèi)陷形成早期核內(nèi)體(Early sorting endosome,ESEs),隨后成熟為晚期核內(nèi)體(Late sorting endosome,LSEs)。晚期核內(nèi)體的膜向內(nèi)出芽,形成包含眾多腔內(nèi)囊泡(Intraluminal vesicles,ILVs)的結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)即稱為多囊泡體(Multivesicular bodies, MVBs)。ESCRT 復(fù)合物等分子負(fù)責(zé)將特定的蛋白質(zhì)、核酸等“貨物"分選并裝載到這些囊泡中。MVBs 可與質(zhì)膜或溶酶體融合,如果 MVBs 與溶酶體融合,將被水解。而當(dāng) MVBs 與質(zhì)膜融合時(shí),外泌體才會(huì)被釋放到細(xì)胞外環(huán)境中。另一類主要的細(xì)胞外囊泡——微囊泡(MVs),其形成方式不同,它是直接通過細(xì)胞膜向外“出芽"和脫落而產(chǎn)生的。

 

圖2:細(xì)胞外囊泡(EVs)的生物合成

 

PART03.外泌體的研究意義和挑戰(zhàn)

 

外泌體因其能夠調(diào)節(jié)復(fù)雜細(xì)胞內(nèi)通路,在神經(jīng)退行性疾病和癌癥等多種疾病的治療中展現(xiàn)出巨大潛力。它們可以被改造為遞送載體,精準(zhǔn)輸送短干擾 RNA、反義寡核苷酸、化療藥物及免疫調(diào)節(jié)劑等有效載荷至目標(biāo)細(xì)胞。此外,外泌體自身的脂質(zhì)與蛋白質(zhì)組成可影響其藥代動(dòng)力學(xué)特性,其中的天然成分有助于提高生物利用度并降低不良反應(yīng)。

除了治療潛力外,外泌體還具有輔助疾病診斷的潛力。外泌體廣泛存在于多種生理體液中,可通過液體活檢獲取外泌體復(fù)雜成分的組成信息。因此,基于外泌體的液體活檢在癌癥等疾病的診斷、預(yù)后評(píng)估及治療反應(yīng)監(jiān)測中具有潛在應(yīng)用價(jià)值。

盡管前景廣闊,外泌體走向廣泛應(yīng)用仍面臨諸多瓶頸:

 

  1. 分離純化技術(shù)瓶頸:目前主流方法(如超速離心、尺寸排阻色譜、免疫親和捕獲)在得率、純度、操作復(fù)雜度和成本上難以兼得。從復(fù)雜體液中高效分離出高純度的外泌體,仍是技術(shù)上的核心挑戰(zhàn)。

  2. 規(guī)模化生產(chǎn)與標(biāo)準(zhǔn)化困難:如何實(shí)現(xiàn)臨床級(jí)、高產(chǎn)量、成分均一的規(guī)模化生產(chǎn),是工程化外泌體療法商業(yè)化的關(guān)鍵。不同細(xì)胞來源、培養(yǎng)條件和分離方法導(dǎo)致的產(chǎn)品異質(zhì)性,給質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化帶來巨大困難。

  3. 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)與遞送效率:外泌體在體內(nèi)的分布、代謝、清除規(guī)律尚未闡明。如何提高其向特定器官或細(xì)胞遞送的效率,并避免被肝臟等單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)快速清除,是需要深入研究的課題。

  4. 作用機(jī)制與安全性仍需深究:外泌體攜帶的分子種類繁多,其對(duì)受體細(xì)胞的長期、系統(tǒng)性影響,以及工程化改造后的潛在免疫原性和脫靶效應(yīng),仍需更全面的評(píng)估。

 

PART04.Pharos STEM 下的外泌體

透射電鏡在外泌體研究中具有不可替代的核心意義,被視為該領(lǐng)域的 “金標(biāo)準(zhǔn)"工具之一。透射電鏡(尤其是結(jié)合圖像分析軟件)可以精確測量單個(gè)外泌體的直徑,并統(tǒng)計(jì)群體的粒徑分布。能直觀看到樣本中囊泡大小的異質(zhì)性,以及是否存在尺寸過大(可能為微泡)或過小(可能為脂蛋白)的污染物。

在 Pharos STEM 臺(tái)式場發(fā)射生物電鏡下,可見外泌體多為杯狀或凹陷的圓盤狀(這是 TEM 制樣干燥過程中常見的變形特征),也有球形。尺寸分布在一個(gè)較窄的范圍內(nèi)(典型為 30-150 nm),這是重要的鑒別依據(jù)。

圖片為客戶檢測的樣本,以下均為 Pharos STEM 臺(tái)式場發(fā)射生物電鏡的實(shí)拍圖。

 

參考文獻(xiàn)

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